 
01
                        Gruppo
 di Studio                    
        
                Esperimentatori : R.Mené,M.Kim,A.Tenenbaum,M.Tiziani
        
    
        
        
                N= 29 Ratti Wistar
Peso medio : 421g
Origine degli animali : Biotério Central of Campus of Ribeirão Preto of São Paulo University
Mantenimento : Experimental Pathology Lab of Pathology Department on Medicine School of Ribeirão Preto – USP
Custodia degli animali  : scatole di polipropilene
Cibo per Animali : dieta basica con acqua del laboratorio
Condizioni dell`illuminazione : luce naturale/cicli di buio sotto condizioni basiche controllate. 
Experimentators : A.Tenenbaum,M.Tiziani,R.Mené,Kim
 
02
Utilizzo degli Animali & Campioni Istologici
Microscopia Convenzionale
        
    
        
        
                I topi eranno sotto eutanasia in camere a CO2.
- Incisione della cute con lama nº 23
- Esplorazione ed Isolazione del muscolo pretibiale usando forbici di Metzenbaum.
- Sezione dei tendini con forbici di Mayo .
- Fissazione di Porzioni dei muscoli su matrice di sughero di quercia.
- Incorporazione usando 50% di soluzione al formaldeide - 10% tamponato e 50% di paraffina pura per lo studio sotto microscopio ottico convenzionale.
- Colorazione delle matrici come processo istologico di routine.
- Microtomo usato : Leika RM 2155
- Colorazione dei campioni di muscolo con: ematoxillina-eosina, tricromo di Masson e picro-sirius rosso
- Esaminazione Istologica era realizzata con microscopio convenzionale (Olympus BH2).
- Osservazione sotto luce polarizzata
- La documentazione fotografica era realizzata con microscopio Leika DMR collegato alla camera digitale Leika CD 300F e compatibile con PC.
 
03
Materiale
                                                                          6 ratti/scatola
        
    
        
        
                - Gli Animali furono divisi in 6 scatole, come seguente :
 - 5 ratti per scatola, dalla Nr 1 alla Nr 5.
 - 4 ratti nella scatola Nr 6
- Tutti gli animali erano sottoposti ad una valutazione della camminata con impronte dei piedi su carta speciale ,e previa immersione delle zampe posteriori in una soluzione di sapone
- La Scatola Nr 1 aveva il gruppo di controllo, dove questi ratti avevano ricevuto l`applicazione di 0,1 ml di soluzione salina ( NaCl 0,9%) iniettata nel muscolo pretibiale destro.
- 
I ratti delle scatole da 2 a 5, hanno ricevuto 0,1 ml del Prodotto Originale Endopeel nello stesso muscolo come nel gruppo di controllo. 
- 
La scatola Nr 6 era constituita di 4 ratti, e ciascuno aveva ricevuto 0,5 ml del Prodotto Originale Endopeel, questa volta iniettato nello strato subcutaneo. 
- 
Tutti i ratti erano sottoposti alla valutazione della camminata prima e dopo le rispettive iniezioni. 
 
04
Metodi
Gli Animali erano studiati dopo 
10 giorni- 1 mese- 3 mese -7 mese
        
    
        
        
        
        
        
                
                
            
        
    
10 giorni- 1 mese- 3 mese -7 mese
 
05
Controllo
Dopo iniezione di NaCl 0.5%
        
    
        
        
                Commento : Niente da dichiarare dopo iniezione di soluzione fisiologica salina.
 
Sx:Pretibiale-Non trattato
 
        Dx:Pretibiale-Dopo 0.1 ml NaCl 0.9% IM    
                
            
        
    
06
10 giorni dopo iniezione di Endopeel
Scatola Nr 2
        
    
        
        
                - 10 giorni dopo iniezione 0.1ml di Endopeel nel muscolo pretibiale destro (Dx).
- Si osserva formazioni di vacuole , le quali circondate da linfociti.
- Le quali Vacuole sono differenti dal tessuto necrotico.
- La presenza di linfociti é correlata alla permeabilità delle membrane cellulari.
 
        Sx : Controllo-100x-Giorno10    
                
            
        
    
 
        Dx:100x-Giorno10    
                
            
        
    
 
        Dx :200x-Giorno10    
                
            
        
    
 
        Dx :400x - Giorno10    
                
            
        
    
07
1 mese dopo Iniezione Endopeel
Scatola Nr 3
        
    
        
        
                1 mese dopo Iniezione 0.1ml di Endopeel nel muscolo pretibiale destro ( Dx) .
Che cosa viene visualizzato in nero nella figura Sx : 100x-Giorno30  non é una necrosi come potrebbe immaginare un dilettante.
In effetti, 4 conclusioni devono essere prese in considerazione
- un artefatto di colorazione
- un`assenza di necrosi
- un`apoptosi
- un processo biorigenerativo
 
        Sx : Controllo-100x-Giorno30    
                
            
        
    
 
        Dx:100x-Giorno30    
                
            
        
    
 
        Dx :400x-Giorno30    
                
            
        
    
08
3 mesi dopo Iniezione di Endopeel
Scatola Nr 4
        
    
        
        
                3 mesi (Giorno90) dopo iniezione 0.1ml di Endopeel nel muscolo pretibiale destro ( Dx)
 
        Sx : Controllo-100x-Giorno90    
                
            
        
    
 
        Dx:100x-Giorno90    
                
            
        
    
09
7 mesi dopo Iniezione di Endopeel
Scatola Nr 5
        
    
        
        
                7 mesi (Giorno210) dopo iniezione IM di 0.1ml  di Endopeel nel muscolo pretibiale destro ( Dx).
Restitutio ad integrum completo dopo 7 mesi
 
        Sx : Controllo-100x-Giorno210    
                
            
        
    
 
        Dx:100x-Giorno210    
                
            
        
    
 
Sx :Controllo 50x-Giorno210
 
Dx:50X-Giorno210
10
Iniezione Endopeel nel tessuto subcutaneo SC
Scatola 6
        
    
        
        
                0.5 ml ( 5x 0.1ml): Iniezione SC di Endopeel nel tessuto pretibiale subcutaneo SC destro (Dx).
 
Sx:200x-Controllo-SC
 
Dx-Giorno10-SC-200X
 
Dx-Giorno30-SC-200X
 
Dx-Giorno90-SC-200X
 
Dx-Giorno210-SC-200X
 
Dx-Giorno210-SC-400X
 
-             Endopeel induce una miofibrolisi selettiva reversibile e una risposta infiammatoria approssimativamente nel periodo di 1 mese.
-             I cambiamenti dei tessuti muscolari sono quasi completamente reversibili.
-             Il muscolo é il posto migliore per iniettare Endopeel ,per la sua maggiore efficacità, il controllo e la durata della sua azione.
-             Nessuna necrosi ne ascesso sono stati osservati durante la sperimentazione.
        Other Study applied to Gynecology
    
                
            
        
    
Other Study
    